一、实验目的

1.掌握旋光仪的操作使用。

2.了解旋光法测粗淀粉的基本原理。

二、实验原理

 在加热及稀盐酸的作用下,淀粉水解并转入盐酸溶液中。在一定的水解条件下,不同谷物淀粉的比旋光度是不同的。其[α]D20171~195之间,因此可用旋光法测定粗淀粉的含量。

三、实验仪器、试剂

1.1%盐酸溶液:23.3mL比重为1.19的盐酸用蒸馏水稀释至1000mL,标定后的浓度为0.274±0.001mol/L

2.30%硫酸锌溶液。

3.15%亚铁氰化钾溶液。

4.旋光仪、水浴锅、容量瓶(100mL)、锥形瓶(100mL)、分析天平(感重0.01g)、烧杯。


四、实验步骤

1.称取粉碎过40目筛的样品2.50g(至0.01g)放入200mL烧杯中,沿器壁缓慢加入50mL 1%盐酸溶液,并轻轻摇动使全部样品湿润,然后将烧杯放入沸水浴中。在3分钟内使其沸腾,准确沸腾15分钟,立即取出,迅速冷却至室温。

2.先加入1mL 30%硫酸锌溶液,充分混匀后,再加入1mL亚铁氰化钾溶液,摇匀,并全部转移至100mL容量瓶中,用少量蒸馏水将锥形瓶冲洗几次。若泡沫过多,加几滴无水乙醇消泡,用蒸馏水定容至刻度。混匀后过滤,弃取初始滤液15mL,收集其余滤液充分混匀后进行旋光测定

五、实验结果

淀粉含量(%=

α×100

×100

[α] D20·L·W

 

式中: α——测得的旋光度。

] D20 :淀粉的比旋光度(见表4-1)。

L:旋光管长度(dm)。

W:样品重量(g)。

 

 

 

1   不同粮食淀粉的比旋光度

 

[α] D20

 

[α] D20

 

182.7

马铃薯

195.4

 

184.0

 

171.4

 

181.5

 

179.5

 

185.9

 

181.3

 

184.6

 

 

 

2   实验测得的旋光度值α

 

第二次

第三次

平均值

旋光度值α

8.155

8.160

8.160

8.158

] D20 =182.7

L=2dm

W=2.5008g

所以

淀粉含量(%=

8.158×100

×100=89.28%

182.7×2×2.5008

六、实验说明

1.实验中,沸水浴要准备足量的水。用定时钟准确记时。

2.提前打开旋光仪,使其进入稳定工作状态。

七、实验讨论

(一)实验结果分析

     经查资料可知小麦中淀粉含量一般为53%~70%,而经计算我们组测得的值为89.28%,结果偏高,可能原因有:

(1)该面粉是优质面粉,淀粉含量较高;

(2)旋光仪不够;

(3)可能是由于测定时水温较低导致旋光度偏高,环境温度也有影响;

(4)样液中可能含有旋光度更高的杂质。

 

(二)实验方法

1.本实验采用旋光法测定淀粉含量,本法适用于不同来源的淀粉。

1)优点:重现性好、操作简便、快速,由于淀粉的比旋光度大,直链淀粉和支链淀粉的比旋光度又很接近,因此本法对于可溶性糖类含量不高的谷物样品具有较高的准确度;

2)缺点:蛋白质含量较高的样品,还有一些未知或性质不清楚的样品及淀粉已经受热或变性的样品,如高蛋白营养米粉,用旋光法测定时误差较大。

2.淀粉含量测定的其他方法有:

1)物理法:[1]相对密度法

             [2]折光法

             [3]旋光法

(2)化学法:[1]还原糖法

             [2]碘量法(简便快速、灵敏、准确度高)

             [3]比色法

注:食品中还原糖、蔗糖、淀粉和果胶物质等的测定多采用化学分析法,但所测得的多是糖类物质的总量,不能确定糖的组分及每种糖含量。

(3)色谱法、电泳法:可对各种糖分进行分离和定量。

(4)酶法:灵敏度高、干扰少。可测定葡萄糖、蔗糖和淀粉等。